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技術文章
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PEI轉染試劑的原理及應用
2023-05-15
PEI轉染試劑是一種常用的基因轉染試劑,它可以將外源DNA快速高效地轉入細胞內,常用于基因表達、RNA干擾等研究領域。本文將介紹PEI轉染試劑的原理、優(yōu)點和應用。PEI(聚乙烯亞胺)是一種陽離子聚合物,具有良好的DNA結合能力。在細胞培養(yǎng)基中,PEI可以與外源DNA形成復合物,并通過靜電相互作用與細胞膜結合,從而將DNA引導進入細胞質和細胞核。這種轉染方式稱為PEI轉染。PEI轉染試劑的優(yōu)點在于其高效性和安全性。相對于其他轉染試劑,PEI轉染試劑可以實現(xiàn)更高的轉染效率,甚至在...
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標記二抗的選擇及應用實例
2023-05-11
標記二抗的作用:二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體,上面通常連有酶或熒光素等標簽。由于標記二抗所具備的優(yōu)點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛,如westernblot(通過與特異性抗體結合來鑒定蛋白質),ELISA,免疫組織化學(檢測組織中的特異性抗原),免疫細胞化學(通過免疫學方法檢測細胞的抗原組成),流式細胞術及免疫沉淀(通過抗原與抗體的特異性結合作用來分離相應抗原)。二抗針對某一特定物種(如小鼠)的所有抗體均具有特異性,因而使用標記二抗可以免去對每一個...
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選購線粒體染色試劑盒要考慮哪些因素?
2023-04-13
線粒體染色試劑盒是一種用于分離、純化、檢測和定量分析線粒體的試劑盒。它可以用于研究線粒體DNA含量、線粒體膜電位、線粒體膜透過性等線粒體功能和結構方面的內容。其作用和原理如下:線粒體染色試劑盒作用:1.分離和純化線粒體:通過離心、低速離心分離和高速離心純化方法,使線粒體從細胞中分離出來。2.檢測線粒體DNA含量:線粒體染色試劑盒可以檢測線粒體DNA含量。3.測量線粒體膜電位:線粒體染色試劑盒還可以測量線粒體膜電位。4.測量線粒體膜透過性:線粒體染色試劑盒可以測量線粒體膜透過性...
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蛋白電泳試劑盒的操作方法介紹
2023-04-04
蛋白電泳試劑盒是一種用于分離和檢測蛋白質的實驗材料。它包含有需要用到的試劑和工具,可以快速、方便地進行蛋白質分離和檢測。蛋白電泳試劑盒主要用于分離和檢測蛋白質樣品。通過其含有的試劑和工具,可以進行凝膠制備、電泳分離、染色和凝膠圖像分析等步驟,實現(xiàn)不同數(shù)量和質量的蛋白質的分離和檢測。蛋白電泳試劑盒的原理是利用電泳技術分離蛋白質,當電場作用于凝膠中的蛋白質時,它們會向負極移動。不同大小和電荷的蛋白質會根據(jù)其遷移速度和遷移距離而分離出來。分離完成后,通過染色方法可以使蛋白質產生顏色...
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瓊脂糖凝膠與核酸電泳小知識分享
2023-03-20
影響核酸電泳遷移率的幾個因素1、核酸分子大小在一定濃度的瓊脂糖凝膠中,DNA片段遷移距離和其含有的堿基對數(shù)量成反比,因此可以通過與標準條帶遷移距離進行比較,由此得出目的條帶的大小,但這僅對雙鏈線性的DNA比較準確(DNAMarker一般為雙鏈線狀DNA),且對大于20kb的DNA不適用(普通瓊脂糖凝膠很難將其分開)。2、核酸分子構象DNA分子在電場中的遷移速度不僅和分子量有關,還和它本身的構象有關。相同分子量的線狀、開環(huán)和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中的移動速度不一樣,移動速度次...
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簡單介紹PEI轉染試劑的保存方法
2023-03-15
一、PEI轉染試劑的作用PEI轉染試劑,全稱聚乙烯亞胺(polyethylenimine),是一種常見的DNA、RNA質粒轉染試劑。PEI會與DNA形成一種復合物,并將DNA導入人體細胞內,使其表達您需要的蛋白質。二、PEI轉染試劑的原理PEI轉染試劑的原理是利用PEI分子所帶上的各種官能團對DNA或RNA質粒進行吸附,形成一個復合物,再將該復合物轉運至細胞內,使DNA或RNA質粒得以進入細胞,并在細胞內進行表達。而PEI分子帶上的陽離子基團能夠與細胞的負電荷相結合,從而達到...
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高保真DNA聚合酶的操作方法介紹
2023-03-09
高保真DNA聚合酶是一種具有高準確性和高速度的酶,廣泛應用于PCR擴增、突變篩選、基因克隆、DNA測序等領域。其在基因工程和生物技術研究中有著十分重要的作用。作用原理:高保真DNA聚合酶可將DNA單鏈合成DNA雙鏈,并對DNA進行擴增。該酶的作用機理基于DNA聚合酶基本的催化反應機制:利用DNA單鏈為模板,在DNA聚合酶的作用下,引物與模板互補結合進行DNA聚合反應。高保真DNA聚合酶的主要特點是:具有一定的3’-5’外切活性,能修正因PCR擴增引入的多種誤差,如插入、缺失、...
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DNA聚合酶和RNA聚合酶的異同點
2023-02-22
DNA聚合酶是細胞復制DNA的重要作用酶,目前為止已發(fā)現(xiàn)有5種DNA聚合酶,分別為DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,都與DNA鏈的延長有關。DNA聚合酶RNA聚合酶的相同點:都能以DNA為模板,從5'向3'進行核苷酸或脫氧核苷酸的聚合反應。DNA聚合酶RNA聚合酶的不同點:1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶沒有,當需要解開雙鏈的...
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